2019年11月下旬于贵州西秀区杨武乡洗马塘采集岩生红豆种子，种子采集后进行阴干处理，处理好都将种子放在4℃冰箱中作为实验备用。白菜种子为早熟5号白菜种子。

随机抽取100粒岩生红豆种子样品，采用游标卡尺测量其长径、短径，用1/1000电子天平称量每粒种子的重量；种子千粒重采用百粒法进行测定；含水率采用低恒温烘干法测定。

随机数取A、B两组洗净阴干的岩生红豆种子。第一组（A）不经任何处理，直接用于试验材料；第二组（B）用锉刀划破种皮处理，每组进行3次重复，每次重复使用25粒种子，取不同处理的种子称重记录质量为W₀，然后分别放入小烧杯中中, 采用 80℃的水50 mL进行浸泡，自然冷却后测定吸水率。分别在 1 h、2 h 、4 h 、8 h 、16 h、24 h、36 h 、48 h 、72 h和96 h 后取出种子 ,用滤纸吸干种子表面的水分 ,分别称重并记录质量为W₁、W₂、W₃、W₄、W₅、 W₆、W₇、W₈、W₉、W₁₀。

式中，W₀为种子干质量，W_n为种子在第n次时间点吸水后的质量。

采用沙床作为种子发芽床，设置未去皮(A₁ )、去部分皮(A₂ )、去皮(A₃) 3种种子预处理方式和 30 ℃/25℃(B₁ )、25℃/20℃（B₂）、25℃(B₃ )、20℃(B₄) 4 种发芽温度的试验组合，每个组合 3 个重复，每个重复 30 粒种子。 置床前用做好发芽盒、种子 、镊子等消毒工作，用0.15%的甲醛溶液浸泡半个小时，将沙放置于100℃的烘箱内进行24 h的高温消毒，置床后放在光照培养箱中进行发芽试验。每7天进行一次发芽数统计。

分别选取种皮和种胚各 5 g ,进行充分粉碎，然后分别置于 250 mL 的容量瓶中, 于每个容量瓶中加入 150 mL 体积百分数为 80%的甲醇, 进行反复摇匀，然后放在4℃左右冰箱中密闭浸提72 h , 将浸提液在35 ℃下减压浓缩到 50 mL (浓度为 0.1 g·mL^–1)。

以白菜种子为试验材料进行内源性抑制物生物活性测定，方法参照文献^[9] 。在培养皿中放置滤纸，将白菜种子分成两组，一组分别加入 5 mL种皮浸提液(0.10 g·mL^–1)，50%种皮浸提液(0.05 g·mL^–1)，10%种皮浸提液(0.01 g·mL^–1)，另一组分别加入 5 mL种胚浸提液(0.10 g·mL^–1)，50%种胚浸提液(0 .05 g·mL^–1)，10%种胚浸提液(0.01 g·mL^–1), 对照组采用蒸馏水对白菜种子进行处理，每处理重复3次，每次重复置床白菜种子 50 粒，于光照培养箱中进行发芽试验，48 h 后统计发芽率。

式中N₁为正常幼苗数，N₀为供试种子数，N₂为发芽达到发芽高峰时的累计发芽种子数。

试验数据方差分析采用SPSS18.0软件进行、duncan’s多重比较及制图。

岩生红豆种子物理性状如表1所示，岩生红豆种子平均长径为0.96 cm，长径范围为0.59~1.12 cm，变异系数为8.17%；种子平均短径为0.82 cm，短径范围为0.51~0.93 cm，变异系数为6.49%；种子千粒重为419.4 g，种子重量范围0.182~0.424 g，平均单粒重为0.407 g，单粒重变异系数为12.42%；含水率为12.68%。从岩生红豆种子物理性状测定结果看，该种子属于中粒种子，种子大小变化较大。千粒重与种子长短经大小呈正比，种子长短经越大，种子越重。

岩生红豆种子吸水率及累计吸水率如图1所示，岩生红豆种子吸水率处理组（B）与对照组（A）差异较大，未进行处理（A）的岩生红豆种子吸水率极低，用小刀划伤种子种皮后种子吸水率得到了很大的提高。说明岩生红豆种子种皮非常致密，透水性较差，划伤种皮后有助于岩生红豆种子吸水萌发。从处理组（B）来看，岩生红豆种子吸水率随时间的增加而增大，但在16 h内吸水率均较低，累计吸水率仅为15.35%，16 h后吸水率迅速提高，在36 h时吸水率达到最大值，吸水率为33.2%，在96 h时吸水率达到恒定，累计吸水率达63.63%，比为做处理的吸水率高60.56%。

图  1  不同处理条件下岩生红豆种子吸水率和累计吸水率

Figure 1.  Water absorption rate and cumulative water absorption of Ormosia saxatilis seed under different treatment conditions

由表2可知，在不同预处理条件下，岩生红豆种子的发芽开始时间、发芽结束时间和发芽高峰期均产生了明显的变化。与未去皮处理（A₁）相比，去皮处理（A₃）的岩生红豆种子发芽开始时间、发芽结束时间和发芽高峰期均有所提前，发芽开始时间提前了4.3 d，发芽结束时间提前了13.7 d，发芽高峰期提前了5.5 d；三者开始发芽、发芽结束和发芽高峰期所用时间长短顺序均为A₁>A₂>A₃。不同预处理的岩生红豆种子发芽率和发芽势差异显著（p < 0.01），

发芽率和发芽势均以A₃最大，分别为45.5%和41.0%，其次是A₂，A₁处理的种子发芽率和发芽势均最小，比A₁处理的种子发芽率高25.7%。为25.7%。在变温30℃/25℃（B₁）下，A₃发芽率与A₁发芽率之差为20%，发芽势之差为16%；在变温25℃/20℃（B₂）条件下，A₃发芽率与A₁发芽率之差为33%，发芽势之差为33%；在恒温25℃（B₃）下，A₃发芽率与A₁发芽率之差为24%，发芽势之差为20%；在恒温20℃（B₄）下，A₃发芽率与A₁发芽率之差为26%，发芽势之差为9%。说明岩生红豆种子种皮致密，透水透气性差，影响其萌发对水分和氧气的吸收，导致岩生红豆种子发芽受阻，在去除种皮或部分去皮的情况下，岩生红豆种子吸收水分和氧气的限制因素得到了缓解，进而促进种子发芽。

由表2可知，温度也是影响岩生红豆种子发芽开始时间、发芽结束时间和发芽高峰期的一个关键因子，在变温25℃/20℃条件下，岩生红豆种子发芽开始时间、发芽结束时间和发芽高峰期均为最短，其次是恒温25℃条件下的种子，变温30℃/25℃和恒温20℃条件下时间最长。从发芽率和发芽势来看，在同一预处理条件下不同温度处理的岩生红豆发芽率和发芽势差异显著（p<0.01）。在变温25℃/20℃（B₂）条件下岩生红豆种子发芽率和发芽势均为最高，分别为61.0%和55.0%；其次为恒温25℃（B₃）处理的种子，分别为45.0%和49%；变温30℃/25℃和恒温20℃处理的种子发芽率和发芽势均为最低。在A₃处理下B₂与B₄发芽率、发芽势之差分别为24%、28%；在A₂处理下B₂与B₄发芽率、发芽势之差分别为8%、18%；在A₁处理下B₂与B₄发芽率、发芽势之差分别为17%、4%。表明，岩生红豆种子最佳发芽温度为25℃/20℃（B₂）。

由表2可知，在种皮和温度处理的2个组合中，A₃B₂组合条件下岩生红豆种子发芽率和发芽势均为最高，分别为61.0%和55.0%；A₃B₃次之，分别为45.0%和49.0%；组合处理表现最差的是A₁B₄，分别为11.0%和18.0%；说明岩生红豆种子发芽以全部去除种皮，变温25℃/20℃发芽效果最好。

由表3可知，与对照组相比，种皮浸提液和种胚浸提液均对白菜种子的萌发具有抑制作用。对于同种浸提液而言，不同浓度处理对白菜种子发芽率和萌发抑制率均存在显著差异（p<0.01），且随着浓度的增加种子发芽率逐渐降低，萌发抑制率逐渐增大。种皮浸提液在0.01 g·mL^–1、0.05 g·mL^–1和0.1 g·mL^–1浓度时的白菜种子发芽率分别比对照组降低20.0%、42.0%和64.0%，萌发抑制率增加25.6%、53.9%和84.6%；种胚浸提液浓度为0.01 g·mL^–1、0.05 g·mL^–1和0.1 g·mL^–1时的白菜种子发芽率分别比对照组降低8.0%、16.0%和38.0%，萌发抑制率增加10.3%、20.5%和48.7%；此外，在相同浸提液浓度下，种皮浸提液对白菜种子萌发的抑制作用明显高于种胚，浸提液浓度为0.01 g·mL^–1时，种皮浸提液处理的萌发抑制率比种胚高15.3%; 浸提液浓度为0.05 g·mL^–1时，种皮浸提液处理的萌发抑制率比种胚高33.4%, 浸提液浓度为0.1 g·mL^–1时，种皮浸提液处理的萌发抑制率比种胚高35.9%,说明岩生红豆种皮浸提液中抑制种子萌发的物质明显高于种胚。

岩生红豆种子属于中粒种子，其种子粒径和重量变幅较大。种子千粒重419.4 g，含水率为12.68%。野外调查发现，已接种的岩生红豆母树下几乎没有发现岩生红豆幼苗生长，而且将岩生红豆种子采下后进行播种育苗出苗率几乎为零，说明岩生红豆种子存在休眠现象。本研究发现岩生红豆种子种皮坚硬致密，透水透气性差，用小刀划伤种子种皮后能有效改善种皮的透性，使种子吸水性得到了很大的改善，其吸水率在96 h达到恒定，累计吸水率为63.63%，比不做处理的种子增加60.56%。说明岩生红豆种子种皮坚硬致密限制其对水分和氧气的吸收是影响岩生红豆种子发芽的主要原因之一。这与大多数豆科植物种子特性相同^[10-13]。

岩生红豆种子去皮处理后发芽率最高，达45.5%，比未去皮处理的种子发芽率高25.7%。这也证明了岩生红豆种皮坚硬致密，对豆种子的萌发具有限制作用。岩生红豆发芽温度以变温25℃/20℃最佳，其次为恒温25℃。最差的为恒温20℃。岩生红豆发芽以去除种皮和变温25℃/20℃处理组合发芽效果最好，发芽率高达61.0%。说明变温处理可以促进种子的萌发，宋美芳等在草果种子萌发特性研究中也得出相似结论^[14]。

目前，许多植物种子休眠的主要原因是种子中含有抑制物质，如桂花^[15]、南方红豆杉^[16] 等树种都存在抑制种子萌发的物质。本试验发现，岩生红豆种皮浸提液和种胚浸提液均能抑制白菜种子的萌发，随着浓度的增加，萌发抑制率逐渐增大，种子发芽率也逐渐降低，而且种皮抑制作用明显大于种胚，在种皮浸提液0.01 g·mL^–1、0.05 g·mL^–1和0.1 g·mL^–1下，白菜种子发芽率分别比对照组降低20.0%、42.0%和64.0%，萌发抑制率增加25.6%、53.9%和84.6%；这说明种皮和种胚中存在抑制物质也是引起岩生红豆种子休眠的另一个重要因素。

目前，有关种子萌发抑制物质的研究很多，不同的植物种子中抑制物质种类不同，但生物碱、脱落酸、香豆素、醛类、酚类、芥子油等是学者们一致认可的种子萌发抑制物质^[17]，而且在很多存在休眠现象的种子中均有发现。针对因抑制物质引起的种子休眠，最佳的处理办法是先弄清楚休眠抑制物质种类，再采取有效措施解除种子的休眠。本研究虽然得出岩生红豆种皮和种胚中存在抑制物质，但抑制物质种类尚不清楚，很难提出有针对性的处理措施，今后将进一步开展岩生红豆种子抑制物质测定研究，并探索破除岩生红豆种子休眠的技术措施，以找出最佳的破除休眠方法，为岩生红豆种苗生产提供理论依据。